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生产车间PCR实验室样本暂存室有哪些规定?

时间:2023-08-05 09:11:23来源:网络作者:维度经济网

国家关于PCR实验室三区的使用制度有哪些?

1、试剂贮存和准备区该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。 2、标本制备区 该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。 3、扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进

pcr实验室建设标准是什么?

这里从PCR实验室布局、工作区域的主要功能和设备配置、实验室的通风系统及压力控制及其他注意事项来解说。

基因扩增实验又称PCR实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学各个领域。

例如:艾滋病检测、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断,DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证、动植物检疫,动物及其衍生产品检测,动物饲料、化妆品、食品卫生检测,转基因作物与转基因微生物检测等。

PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。

不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密相连,需安装物品传递窗。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,扩增前区与扩增后区应严格分开。

1、试剂准备区:主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

2、样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。

3、扩增区:该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定。此外,反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液和已制备的DNA模板(来自标本制备区)的加入等也可在本区内进行。对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。

为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。该区域的设备主要是核酸扩增热循环仪、加样器、超净台等。

其中热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响主要进行DNA扩增。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。

4、扩增产物分析区:扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

各区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送、排风的比例以保证各实验区压力要求。
另外,PCR实验室内通常有生物安全柜、通风柜等生产设备,这类设备排风量大且使用时间有间隔性,并不与空调系统运行时间一致,这就导致有这些设备的房间在设备启停的时候很容易失压,原本正常的压力梯度瞬间就破坏了。这正是PCR实验室空调系统设计的难点所在。

实验室围护结构应牢固、气密性好。所有阴阳角宜采用圆弧过渡,墙体内壁光洁、不积尘、耐腐蚀、易清洗消毒。地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

请述如何进行pcr实验室的工作独立分区,pcr实验室分区有哪些要求

  • 要求及功能分区PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用 不同的工作服(例如不同的颜色)。

  • 工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,

  • 四区域分别 1.试剂配制区n2.样品处理区n 3.核酸扩增区n 4.产物分析区n 如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。

  • 各区的功能是:

  • 1.1.1 试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。

  • 1.1.2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。

  • 1.1.3 扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

  • 1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。

  • 1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。

  • 1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内: 1.4.1 在生物安全柜内操作。

  • 1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。

  • 1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。

  • 1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。

  • 设计要求:

  • PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。完成一组PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还 应增加样品粉碎过程。

  • 一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。

  • 对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。

  • 二、组合形式

  • 所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域 的形式。对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体 布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。 试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通 过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。

  • 核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通 过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

  • 在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向 室内。

  • PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺 装好后2600mm处。 如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。

  • 若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间 比专用走廊更有意义。 各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免 实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。 实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;

  • 所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内 壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

  • 主要设备 试剂准备区 仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、天 平除了要专用外,还应有定期校准。 试剂分装应在超净台中进行 扩增反应混合液应使用分子 生物学级的,试剂制备好后应有质检:一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。 标本制备区 仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等 扩增区 扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。扩 增仪需进行校准。并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对扩增效果的影响。 分析区 本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等 洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的.

  • 主体结构:主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污 染、积尘、不易清扫等问题。

  • 结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。 标准的四区分隔和气压调节:将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增,产物分析四个独立的实验区。整个区域有一个 整体缓冲走廊。

  • 每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试 剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

  • 可打开缓冲区,缓冲区和 PCR 扩增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上 都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。

  • 消毒:在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。

  • 在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。 不锈钢传递窗:试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在 传递过程中不受污染(人物分流)。

  • 地面地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀。 照明灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。 在建设的过程中应注意: 规范的安装流程和全面的服务流程。

pcr实验室建设标准是什么?

1、pcr实验室区域选择建设材料:墙面应选择结构牢固,气密性好,无死角,墙体易清洁易消毒,不积尘,耐腐蚀等特点。地面:选择pvc卷材或环氧树脂自流平耐腐蚀,易清洁材料。

2、准备制备扩增分析,为了避免交叉污染,实验区设计全排风、全新风系统要求,保持阶梯性压差(有正压至负压)。实现工艺、物品、人员、气压气流单向流程保护。

3、pcr实验室没有太严格等洁净度要求,可根据多方面因素全面考虑。

基本功能介绍:

1、准备区、实验所需试剂的准备工作,分装等,由传递窗运送至制备区,严谨走人员通道。

2、制备区、主要进行样品等保存,rna\dna的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定rna\dna的合成。

3、扩增区、dna的扩增,以制备的dna模版和合成的cDNA的加入和主板反应混合液制备成反应混合液等也可在扩增区内进行,在巢式pcr测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高等污染危害性,星空次加样必须在本区完成。

4、扩增分析、主要用来做扩增产物的测定,本区是主要的扩增产物污染来源,因此必须主意避免通过本区的物品或者工作服将扩增产物带出。

规范的PCR实验室是什么样

VOLAB专业1.可共用建筑物,但应自成一区,宜设在一端或一侧,与建筑物其他部分可相通.宜将实验室划分为三区,即污染区、半污染区和清洁区(建筑面积以不小于40平方米为宜). 2.实验区应设洗手池,宜采用非手动水龙头;在靠近出口处也应设洗手池. 3.实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学九游消毒剂的腐蚀.地面应防滑,不得铺设地毯. 4.实验室门应带锁并可自动关闭,门应有可视窗. 5.应有足够的存储空间摆放物品以方便使用.在实验区域外还应有供长期使用的存储空间. 6.在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件.在实验室内应使用专门的工作服. 7.在实验室所在的建筑物内应配备高压蒸
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